原代神经元培养BrainPhys™神经元培养基 BrainPhys™是一种成分确定且不含血清的新型神经元培养基,用于培养原代神经元以及人多能干细胞(hPSCs)衍生的神经元,包括胚胎干(ES)和诱导多能干(iPS)细胞。传统的培养基(如:Neurobasal®培养基和Dulbecco’s改良Eagle培养基(DMEM))支持细胞存活,但会抑制神经细胞活性,包括:动作电位的产生和突触的活性。在BrainPhys™中进行成熟培养的神经元经历与中枢神经系统(CNS)生理条件相似的生长环境,可更好地支持神经元在体外的功能性。因此在培养物中具有突触活性的神经元的比例相对较多。此外,BrainPhys™增强了神经元在体外培养中的生理相关性,从而提高了实验发现向临床应用转化的成功率。 长期以来,原代神经元培养一直是一种在可控的环境中研究神经元生物学的强大系统。为获得具有良好形态和功能的健康神经元,使用高品质的培养基和添加物即显得至关重要。要获得最佳的神经元功能和存活率,建议将小鼠或大鼠神经元接种于传统的培养基(如:NeuroCult™神经元基础培养基或Neurobasal®培养基,加入NeuroCult™ SM1神经元添加物或B‑27®添加物)中,然后在体外培养5天后将细胞过渡到加入了NeuroCult™ SM1的BrainPhys™中进行成熟培养。 hPSCs,包括ES和iPS细胞对于研究人神经发育和疾病建模方面极有价值。通过以患者的样本生成iPS细胞,可以获得疾病及患者特异性神经干细胞、神经元和神经胶质细胞。当前发表的生成不同神经元的流程通常在基础培养基中加入神经元添加物(如:NeuroCult™ SM1(基于已发表的B27配方)和N2添加物)、多种细胞因子和小分子。BrainPhys™基础培养基为hPSC向神经祖细胞(NPC)的分化,以及促进下游神经元的成熟提供了一个更具神经生理活性的培养系统,该系统更好地模拟了人脑的内部环镜。将Brai nPhys™培养基与NeuroCult™ SM1、N2添加物-A、GDNF、BDNF、cAMP一同使用,可促使hPSC衍生的神经祖细胞有效生成神经元。以下是几种培养基性质的比对和相关的产品: 对勾表示了与生理条件相似和支持的活性。
NeuroCult™SM神经元培养添加物 使用标准化的NeuroCult™SM添加物和培养基试剂盒,可用于需要基质和无需基质的原代神经元培养。NeuroCult™SM1和NeuroCult™SM2是根据已发表的B27配方开发设计的,且已经过优化,对于支持成熟神经元培养具有出色的一致性。 标准化的神经元培养添加物包含了多种复杂成分。这些原料及相关制造过程的质量差异性都将导致该添加物品质的变化。NeuroCult™SM神经元培养基添加物的设计和生产均为培养出可重复的、高品质的培养物做了充足准备。这些添加物与NeuroCult™神经元基础培养基配合使用,使培养性能达到最佳效果。 NeuroCult™SM1 对原代神经元进行长期培养时提高其存活率。NeuroCult™SM1支持对具有功能性的成熟神经元进行长期培养,培养物批次间差异小、重复性高,且神经胶质细胞的污染极少。免疫染色证实,在体外培养21天时,培养于NeuroCult™SM1中的神经元在形态上已经成熟,显示具有点状的突触前和突触后标志物表达;电生理实验表明,使用NeuroCult™SM1培养的神经元在功能上也已成熟。
NeuroCult™SM2 通过无需基质的神经元培养,减少实验中的差异性。NeuroCult™SM2神经元培养基添加物是新一代神经元培养添加物,它可在无培养基基质的支持下培养原代神经元。培养基的质量、制备方法和包被流程的不一致都将影响神经元的培养。NeuroCult™SM2可消除由基质和培养基造成的差异性。相比在需要基质的条件下使用传统无血清培养基,添加NeuroCult™SM2的NeuroCult™神经元基础培养基可支持培养数量相当的活性神经元,每个细胞上延伸出的神经突触也相近。在无基质条件下使用NeuroCult™SM2培养的神经元也具有相近的神经突平均长度和分支点平均数。
N2神经培养添加物 N2 Supplement-A和B是人和小鼠ES和iPS细胞向神经和胰腺分化的添加物。N2添加物适用于所有的神经细胞,不只是神经元细胞。Stemcell产品N2添加物有N2添加物-A(含全转铁蛋白)和N2添加物-B(含载脂转铁蛋白)两类,它们批次间差异性小、可以大大的提高实验结果的重复性。与NeuroCult™或BrainPhys™基础培养基配合使用可优化原代神经元的培养和 hPSC衍生的神经祖细胞的分化。 RD神经培养添加物相关产品
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